Funktion der SNARE-Proteine mUSE1 und mSEC20 sowie von mTIP-20 beim Golgi-ER-Transport in Säugerzellen

• Antragsteller: Professor Dr. Hans-Dieter Söling (†)
• Fachliche Zuordnung: Biophysik
• Förderung: Förderung von 2003 bis 2006
• Projektkennung: Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) - Projektnummer 5401716

Das Säuger-Ortholog (mUSE1) des von G. Fischer von Mollard unlängst gefundenen SNARE-Proteins USE1 aus S.cerevisiae (Manuskript in Vorbereitung) konnte von uns in das endoplasmatische Retikulum (ER) lokalisiert werden. Im Rahmen des Projekts soll untersucht werden, ob mUSE1 am retrograden Golgi-ER-Transport beteiligt ist und ob es dabei zu Interaktionen nicht nur mit mSEC22b und Syntaxin 18, sondern auch mit bei uns in Klonierung begriffenen Säuger-Orthologen der Hefeproteine Sec 20 und TIP20 kommt. Im Rahmen dieses Projekts soll nicht nur die Rolle dieser Proteine am Docking/Fusions-Prozess, sondern auch deren mögliche Beteiligung am Cargo-Sorting und/oder Budding im cisGolgi untersucht werden. Protein-Interaktionen sollen sowohl biochemisch, als auch durch FRET-Messungen an lebenden Zellen untersucht werden. Durch gezieltes knock-down von mUSE1 und mSEC20 (si-RNA Technik, direkt oder über pSUPER-Vektor) und Mikroinjektion von funktionellen Antikörpern-Fab-Fragmenten sollen weitere Einsichten in die Funktion der Proteine gewonnen werden.

• DFG-Verfahren: Sachbeihilfen