Untersuchung des peroxisomalen Protein-Importes mittels super hochauflösender Lichtmikroskopie in der Hefe Saccharomyces cerevisiae

• Antragstellerin: Dr. Katharina Reglinski
• Fachliche Zuordnung: Biochemie ; Stoffwechselphysiologie, Biochemie und Genetik der Mikroorganismen
• Förderung: Förderung von 2016 bis 2017
• Projektkennung: Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) - Projektnummer 322325142

Peroxisomen sind Zellorganellen, die in fast allen eukaryotischen Zellen vorkommen und von einer einfachen Lipiddoppelschicht umgeben sind. Mutationen der so gennannten peroxisomalen Biogenese Faktoren führen zu schweren Stoffwechselerkrankungen, was die Bedeutung der Peroxisomen hervorhebt. Die Erforschung peroxisomaler Funktionen und Prozesse ist, unter Verwendung biochemischer Verfahren und Methoden, weit fortgeschritten. Um dynamische Prozesse in lebenden Zellen zu untersuchen sind jedoch Methoden wie die super hochauflösende optische STED (Stimulated Emission Depletion) Mikroskopie erforderlich. Initiiert durch die Forschergruppe 1905 (Struktur und Funktion des peroxisomalen Translokons) wurde eine erfolgreiche Zusammenarbeit zwischen den Gruppen von Prof. Erdmann an der Ruhr Universität Bochum und Prof. Eggeling an der Universität Oxford etabliert. Somit wurden die weitreichenden Expertisen beider Gruppen, bezüglich Peroxisomen und optischer Mikroskopie, kombiniert und im Rahmen dieser Kooperation konnten bereits erfolgreiche Untersuchungen an Peroxisomen in humanen Zellen vorgenommen werden. Für ein detailliertes Verständnis der Funktionen der verschiedenen peroxisomalen Proteine müssen diese jedoch spezifisch genetisch modifiziert werden. Derartige Modifikationen der peroxisomalen Biogenese sind bereits erfolgreich in Hefe Stämmen etabliert worden, die von der Gruppe von Prof. Erdmann zur Verfügung gestellt werden. Ziel ist es, die dynamische Organisation der Proteine, die in den peroxisomalen Proteinimport involviert sind, mit Hilfe von STED Mikroskopie zu untersuchen. Dafür müssen zunächst Protokolle für das Anfärben peroxisomaler Proteine in den verschiedene Hefe Stämmen etabliert und optimiert werden, um ein besseres Verständnis der grundlegenden Mechanismen des peroxisomalen Proteinimportes und der peroxisomalen Proliferation zu erhalten.

• DFG-Verfahren: Forschungsstipendien
• Internationaler Bezug: Großbritannien
• Gastgeber: Professor Dr. Christian Eggeling