Fluorescence Imaging System
Zusammenfassung der Projektergebnisse
Das Konfokale Laserendomikroskopie-Gerät (pCLE) wurde durch verschiedene Kliniken und Abteilungen des Klinikums Großhadern der LMU München (HNO-Klinik, Urologische Klinik, Medizinische Klinik II und Laser-Forschungslabor) und durch die Pulmonologie, Klinikum Gauting genützt. In der HNO war die pCLE hilfreich um laryngeale Hyperplasien und Dysplasien zu differenzieren, was für die Behandlung der Patienten von großer Bedeutung ist, da höhergradige Dysplasien einer chirurgischen Exzision bedürfen, wohingegen Hyperplasien keiner weiteren Behandlung bedürfen. Dabei zeigte die pCLE nach intravenöser Verabreichung von Fluorescein bei Hyperplasien regelmäßige Epithelzellen, was Form und Grüße angeht, wohingegen die Zellgröße und -form bei Dysplasien stark variierte. Zudem wurden ex vivo Proben von gesunder Schleimhaut und von Plattenepithelkarzinomen aus dem Mund- Rachenraum untersucht. Die Proben wurden topisch mit unspezifischen (Fluorescein) und spezifischen (EGFR-Antikörper, EpCAM-Antikörper) Fluoreszenzfarbstoffen angefärbt. Dadurch konnten zelluläre und strukturelle Eigenschaften des Gewebes aufgezeigt werden. In der Urologie wurde die pCLE zur Darstellung von Spermatozoen verwendet. Bei Azoospermie werden Spermatozoen routinemäßig im Rahmen einer testikulären Spermienextraktion (TESE) gewonnen – dies gelingt jedoch bei weitem nicht immer, weil der Ort der Gewebeentnahme aus dem Hoden zufällig bestimmt wird. Mit pCLE konnten Tubuli seminiferi und vitale Spermatozoen klar dargestellt werden. Dies könnte in Zukunft die Erfolgsrate bei der TESE deutlich erhöhen. Ebenso wurden ex vivo die männlichen Geschlechtsorgane von gesunden Männern (im Rahmen von geschlechtsumwandelnden Operationen gewonnen), Mäusen und Ratten untersucht. Dabei konnte die Mikroarchitektur der männlichen Geschlechtsorgane als auch einzelne Spermatozoen dargestellt werden. In der Pulmonologie gelang es mittels pCLE ohne den Einsatz von Fluoreszenzfarbstoffen alveoläre Strukturen darzustellen. Dabei konnten die Alveolen sicher und problemlos erreicht werden. Bindegewebsfasern oder, im Rahmen von entzündlichen Lungenerkrankungen, eingewanderte weiße Blutkörperchen konnten klar aufgezeigt werden. Die pCLE war sehr hilfreich zur gezielten Biopsieentnahme und sollte das Risiko des Understagings oder einer Fehldiagnose bei fobrotischen Lungengerüsterkrankungen deutlich verringern.
Projektbezogene Publikationen (Auswahl)
- Confocal laser endomicroscopy in head and neck cancer: steps forward? Curr Opin Otolaryngol Head Neck Surg. 2013 Apr;21(2):164-70
Volgger V, Conderman C, Betz CS
(Siehe online unter https://doi.org/10.1097/MOO.0b013e32835df135) - Probe-based confocal laser endomicroscopy (pCLE) - a new imaging technique for in situ localization of spermatozoa. J Biophotonics. 2015 May;8(5):415-21
Trottmann M, Stepp H, Sroka R, Heide M, Liedl B, Reese S, Becker AJ, Stief CG, Kölle S
(Siehe online unter https://doi.org/10.1002/jbio.201400053) - Probe-based confocal laser endomicroscopy (pCLE): a preclinical investigation of the male genital tract. Lasers Med Sci. 2015 Oct 30
Trottmann M, Sroka R, Stepp H, Liedl B, Becker AJ, Stief CG, Kölle S
(Siehe online unter https://doi.org/10.1007/s10103-015-1828-0) - Evaluation of Confocal Laser Endomicroscopy as an aid to differentiate primary flat lesions of the larynx: A prospective clinical study. Head and Neck Vol 38 Issue 1, April 2016, Pages E1695-E1704
Volgger V, Girschick S, Ihrler S, Englhard AS, Stepp H, Betz CS
(Siehe online unter https://doi.org/10.1002/hed.24303)