Konfokales Laserscanning Mikroskop
Final Report Abstract
Der Lehrstuhl für Phytopathologie hat das CLSM Gerät zur strukturellen Charakterisierung von Pflanzen, zur Lokalisierung von markierten Proteinen in vivo und zur Quantifizierung von Protein-Protein-Interaktionen genutzt. Das Gerät ist das zentrale Forschungsinstrument der Arbeitsgruppe und wird von der Mehrzahl der wissenschaftlichen Mitarbeiter genutzt. Im Einzelnen haben wir Zellstrukturen in der Epidermis von transgenen RACB-G Protein Mutanten der Gerste über propidium jodide Färbung darstellt. Das zeigte eine Rolle des G-Proteins in polarisierten Wachstumsprozessen. Die Polarität des Endomembransystems wurde mit Hilfe von bekannten und neu-entwickelten Endomembranmarkern in der Interaktion mit Echten Mehltaupilzen dargestellt. Darüber hinaus wurden Proteine mit fluoreszierenden Proteinen markiert und in vivo in ihrer Dynamik der subzellulären Lokalisation visualisiert. Das zeigt subzelluläre und zum Teil nach Pathogenattacke dynamische Verteilung der Proteine innerhalb der Zelle und ihrer Kompartimente. Dabei wurden 2-4 dimensionale Bilder und Filme erstellt und eine neue Informationstiefe erreicht. Wir haben das Gerät weiter genutzt, um in planta Protein-Proteininteraktionen über Bimolekulare Fluoreszenzkomplementation und Förster-Resonanz Energie Transfer nachzuweisen. Zurzeit wird das Gerät besonders stark zur Darstellung von Proteinaakumulationen in Membrandomänen und in der Pathogenese-abhängigen Umorganisation der Mikrotubuli in der Zellkortex eingesetzt.
Publications
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Hückelhoven R, Panstruga R
(See online at https://doi.org/10.1016/j.pbi.2011.08.002)
