(Wortlaut des Antrags)Der auswärtsgleichrichtende Kaliumkanal (Duk1) im Plasmalemma von Saccaromyces cerevisiae ist der erste Vertreter einer neuen Familie von Kaliumkanälen. Markenzeichen dieser Kanalfamilie ist das Vorhandensein von zwei sogenannten Pore-Segmenten, die den Selektivitätsfilter in spannungsabhängigen Kaliumkanälen darstellen sollen. Im beantragten Projekt sollen detaillierte Struktur-Funktionsstudien an Duk1 durchgeführt werden. An gezielt konstruierten Punktmutanten soll durch Patch-Clamp Analysen die Bedeutung von i) Phosphorylierungsstellen, ii) cytoplasmatischen Histidinen sowie iii) geladenen und hydrophoben Aminosäuren in der Porenregion für die beobachtete i) ATP-Abhängigkeit, ii) cytosolische pH-Regulation, sowie für iii) Gating, Permeation und Selektivität untersucht werden. Großflächige Deletionen sollen zeigen, welche Rollen der sehr stark positiv geladene S6/S7-Linker und der lange C-Terminus bei der beobachteten Inaktivierung von Duk1 spielen und ob die ersten vier Transmembranhelices (S1-S4), die dem pflanzlichen Homolog, KCO1, fehlen, für die Funktion von Duk1 essentiell sind.
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