Untersuchungen zur dendritischen Lokalisierung der arg3.1/Arc mRNA

• Applicant: Professor Dr. Dietmar Kuhl
• Subject Area: Cell Biology
• Term: from 2002 to 2008
• Project identifier: Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) - Project number 5233958

Obwohl man annimmt, daß die dendritische Lokalisierung von mRNAs auf Protein-RAN Interaktionen beruht, sind bislang noch keine Transport- oder Targeting-Proteine identifiziert worden. Unter Verwendung der Tri-Hybrid Methode haben wir ein hippocampales Protein identifiziert, das spezifisch mit der Arg3.1/Arc und der CaMKII mRNA aber nicht mit nicht-dendritisch lokalisierten Konroll-RNAs interagiert. Wir nennen dieses Protein Zinki, weil es ein sich wiederholendes Zinkfingermotiv, wie es in anderen RNA-Bindungsproteinen gefunden wurde, enthält. In unabhängigen biochemischen Analysen wurde die spezifische Bindung von Zinki an Arg3.1/Arc mRNA bestätigt. Die Expression von Zinki Protein kolokalisiert in Neuronen mit der dendritischen Verteilung der Arg3.1/Arc und CaMKII mRNAs. Für die Bindung von Zinki an die Arg3.1/Arc mRNA sind cis-Elemente notwendig, die zumindest teilweise in der kodierenden Region liegen. Transgene/Knock-out Experimente zeigten, daß für die dendritische Lokalisierung der Arg3.1/Arc mRNA ein Teil der kodierenden Region notwendig ist. Diese Region überlappt mit der Sequenz, an die Zinki bindet. In folgenden Versuchen soll nun die Funktion des dendritischen Arg3.1/Arc Transports und die Funktion von Zinki aufgeklärt werden. Zudem möchten wir ein reverses Tri-Hybrid-System entwickeln und Zinki als Köder benutzen, um nach weiteren bislang unbekannten dendritischen mRNAs zu suchen.

• DFG Programme: Research Grants