Molekularbiologische und biochemische Untersuchungen an den Fucoxanthin/Chlorophyll a/c bindenden Proteinen (Fcps) der zentrischen Diatomee Cyclotella cryptica

• Applicant: Privatdozent Dr. Erhard Rhiel
• Subject Area: Plant Biochemistry and Biophysics
• Term: from 1998 to 2006
• Project identifier: Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) - Project number 5086260

Das heterogene, aus Fucoxanthin/Chlorophyll a/c bindenden Proteine bestehende Antennensystem der zentrischen Diatomee Cyclotella cryptica soll molekularbiologisch und biochemisch weiter untersucht werden. Die Klonierung von drei fcp Genen in Expressionsvektoren und erste Rekonstitutionsexperimente waren erfolgreich. Diese fcp Gene sollen überexprimiert und die rekombinanten Polypeptide aufgereinigt und in weitere Pigmentbindestudien eingesetzt werden. Die mit Pigment beladenen Polypeptide sollen in ersten 2D-Kristallisationsexperimenten eingesetzt werden. Die Auftrennung der beiden Photosysteme ist ebenfalls erfolgreich verlaufen. Durch Western-Immunoblotting mit homologen und heterologen Antiseren und mit Antiseren, die in den einzelnen Fcp Proteinen spezifische, im Stroma bzw. im Thylakoidlumen exponierte Domänen erkennen, soll nachgewiesen werden, welche Fcp Untereinheiten mit Photosystem I, bzw. Photosystem II assoziiert sind. Diese Untersuchungen sollen durch Immunogoldmarkierungsexperimente an Gefrierbruchreplika erhärtet werden. Weiterhin ist eine genomische Genbank von Cyclotella cryptica angelegt worden. Diese soll mit den bereits klonierten fcp Genen als Sonden gescreent werden, um die entsprechenden genomischen Sequenzen zu erhalten. Die genomischen Gensequenzen sollen auf mögliche Promotoren und weitere regulatorische Sequenzen hin untersucht werden. Ein Vergleich dieser Sequenzen mit Daten der Lhc Genfamilien von Höheren Pflanzen soll die Untersuchungen abschließen.

• DFG Programme: Research Grants