Identifizierung zelltypischer Signalmoleküle im TrkA-Signalweg mit Hilfe von Anti-Phospotyrosin-Antikörpern und SH 2-Domänen-Profilen

• Antragstellerin: Dr. Alexandra Koch
• Fachliche Zuordnung: Zellbiologie
• Förderung: Förderung von 2006 bis 2009
• Projektkennung: Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) - Projektnummer 29837321

TrkA, der Rezeptor für den Nervenwachstumsfaktor (NGF), führt in Neuroblastom-zellen zu Differenzierung oder Apoptose. Die verwandte Rezeptortyrosinkinase TrkB vermag dies nicht, obwohl die Signalwege ähnlich sind, sich aber in der Dauer unter-scheiden. In einer BCR-Abl-positiven Leukämiezelllinie konnte ich zeigen, dass TrkA Proliferation und Überleben fördert und so vor dem Imatinib-induzierten Zelltod schützt. Damit stellt sich die Frage, ob die Signalintensität und/oder die Verwendung zellspezifischer Signalmoleküle über den TrkA-vermittelten Phänotyp entscheidet. Um das zu untersuchen, sollen NGF-stimulierbare Modellsysteme für Differen-zierung, Proliferation, Apoptose und Überleben in Neuroblastom-, Epithel-, hämatopoetische Zellen und Fibroblasten etabliert werden, die Wildtyp-TrkA und funktionelle Mutanten exprimieren. Unterschiede in der Signaltransduktion sollen mit Anti-Phosphotyrosin-Westernblots und durch Erstellen von Profilen spezifischer tyrosinphosphorylierter Motive mit Src-Homologie(SH)2-Domänen erkannt werden. Phänotyp-spezifische Proteine werden über Affinitätschromatographie gereinigt, mittels Massenspektrometrie identifiziert und durch Überexpression oder small interfering(si)RNA-Techniken untersucht.

• DFG-Verfahren: Sachbeihilfen
• Gastgeber: Professor Dr. Matthias Gaestel