Funktion von PhaX im PHB und Polyphosphat Stoffwechsel in Ralstonia eutropha

• Antragsteller: Professor Dr. Dieter Jendrossek
• Fachliche Zuordnung: Stoffwechselphysiologie, Biochemie und Genetik der Mikroorganismen
• Förderung: Förderung von 2013 bis 2016
• Projektkennung: Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) - Projektnummer 239638665

Ralstonia eutropha ist ein PHB und Polyphosphat (PP) speicherndes chemolithoautotrophes beta-Proteobakterium. Das A_2274 Genprodukt (putativer Phosphattransportregulator) mit angrenzendem pitA Gen (Phosphattransporter) wurde in 3 unabhängigen 2-Hybrid Screeningexperimenten als Interaktionspartner von PHB Granula-assozierten Proteinen identifiziert, nämlich den Phasinen PhaP2, PhaP3 und PHB Depolymerase PhaZa1. Phasine sind kleine amphiphile Proteine, die in allen PHB-speichernden Bakterien vorkommen. Unabhängige Evidenz für die Assoziation von A_2274 mit PHB Granula wurde in Proteom Experimenten isolierter PHB Granula erhalten. Eine A_2274 Deletion führte zu einer 3-fachen Erhöhung der PP Bildung bei gleichzeitiger Verminderung der Wiederverwertung von PHB. Der Nachweis des A_2274 Proteins in isolierten PHB Granula, seine in vivo Interaktion mit 3 PHB Granula assoziierten Proteinen und der Phenotyp der A_2274 Deletionsmutante läßt eine Verknüpfung zwischen PHB und PP Metabolismus vermuten; daher wurde A_2274 als phaX bezeichnet. Ziel des Projekts ist es, die Funktion von PhaX im PP und PHB Stoffwechsel zu bestimmen und die Natur der Verbindung zwischen beiden Stoffwechselwegen zu verstehen. Hierzu wird der Effekt von Deletionsmutanten (phaX, pitA, ppk1, ppk2, ppx, phoB, phaZa1, phaC + ausgewählte Kombinationen) auf den PP und PHB Metabolismus unter zu Hilfenahme von Proteomanalysen untersucht werden.

• DFG-Verfahren: Sachbeihilfen