Identifizierung und Rekonstitution detergenzresistenter Membrandomänen in SÄugerspermien und deren Funktion bei der Befruchtung

• Applicants: Dr. Karin Müller; Privatdozent Dr. Jürgen Schiller
• Subject Area: Animal Breeding, Animal Nutrition, Animal Husbandry
• Term: from 2006 to 2009
• Project identifier: Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) - Project number 22585892

Während der Genese von Säugerspermien erfolgt eine gezielte Vorbereitung der Spermienmembranen auf die finalen Fusionsprozesse der Befruchtung, wobei Modifikationen im Cho- lesterolgehalt eine Schlüsselstellung einnehmen. Die Resistenz cholesterolreicher Lipid-Protein-Komplexe gegenüber Detergenzien führte in zahlreichen Zelltypen zur Selektion funktioneller Membrandomänen. Im vorliegenden Projekt sollen unterschiedliche Detergenzien und Präparationsbedingungen auf verschiedenen Stufen der Genese (Reifung, Kapazitäten, Akrosomenreaktion) angewandt werden, um in Spermien befruchtungsrelevante Membrandomänen und deren Veränderungen im Bezug zu cholesterolmodifizierenden Prozessen zu identifizieren. Die zugrunde liegenden Lipidspezies werden mittels Chromatografie, Massenspektrometrie und NMR-Spektroskopie, die zugehörigen Proteine unter Nutzung elektrophoretischer Verfahren sowie Massenspektrometrie analysiert. Rekonstituierte Vesikel aus den präparierten Membranfraktionen werden bezüglich ihrer Wechselwirkung mit Seminalplasma, intrazellulären Strukturen des Spermiums (Zytoskelett, Akrosom) sowie Effektoren im weiblichen Genitaltrakt (Eileiter, Eizelle) untersucht, um nachfolgend die Funktion solcher Domänen in der intakten Zelle zu charakterisieren.

• DFG Programme: Research Grants